随着仪器分析新技术、新方法的发展,各类谱学方法和X射线—衍射等分析手段已在结构测定中得到了广泛的应用。经典的化学方法与仪器分析相结合,使三萜化合物的结构测定快速而准确并达到了微量的水平。化学反应常用于证实分子骨架中取代基类型、数目、位置及构型等。
1.氧化反应 氧化反应主要用来确定分子中所含羟基、羰基或酰基的数目和位置等。应用较多的是将羟基氧化成羰基,比较常用的是铬酐—吡啶的方法,也有将铬酐溶于AcOH中搅拌加入样品中,室温下搅拌2h,用水稀释,氯仿提取,提取液经水洗干燥浓缩后经薄层制备而得到氧化产物。 2.酰化反应 酰化反应对于确定分子中羟基的数目、性质、构型很有帮助,常用的乙酰化反应,通常采用醋酐—吡啶室温处理的方法。
3.水解 由于部分灵芝三萜酸中带有乙酰基,为确定乙酰基的存在和数目,采用了水解的方法,如Komoda将ganoderic acid F溶于甲醇,用5%Na2CO3室温处理3h后,用2mol/L HCl酸化,除去甲醇后用CHCl3萃取,水洗CHCl3液后Na2SO4干燥,蒸干。通过TLC制备得水解产物。
4.还原 还原反应主要用来确定分子中有无不饱和双键及羟基、羰基、取代基的位置。如Nishitoba等人在确定lucidenato G结构时,为了证实C26位上存在着羟基,先将lucidenate G甲基化,然后再用NaBH4进行还原,得到其丙酮化物,从而证实了C26位存在着一个羟基。 |